Серологическое исследование

Содержание

Забор крови для серологических исследований

1. Психологически подготовить пациента. 2. Посадить пациента или положить на спину. 3. Повернуть голову в сторону, противоположную той, где берут кровь. 4. Под локтевой сустав подложить валик. Рука должна быть разогнута. 5. Провестигигиеническое мытье рук. 6. Надеть резиновые перчатки. 7. Наложить жгут на нижнюю треть плеча. 8. Протеретьлоктевой сгиб спиртом. 9. Проколоть шприцем кожу, затем вену, набрать 5 мл крови. 10. Наложить ватный шарик, смоченный спиртом, на место введения иглы. 11. Снять жгут, вынуть иглу из вены. 12. Согнуть руку пациента в локте, оставить ватный шарик со спиртом на 2-3 мин. 13. Осторожно перелить кровь в пробирку. Закрыть пробкой. 14. Пробирку с кровью поместить в термостат при температуре 37°С на 30 мин., затем перенести в холодильник. 15. Продезинфицировать использованное оснащение. 16. Вымыть и осушить руки. 17. Написать направление вбактериологическую лабораторию.

Правила сбора мочи.

Мочу собирают после тщательного туалета наружных половых органов в стерильную бакпечатку с герметичной крышкой. При подозрении на уретрит собирают первую порцию мочи (в начале мочеиспускания), в остальных случаях среднюю порцию мочи (в середине мочеиспускания). Мочу собирают в количестве 10-30 мл.

Время доставки в лабораторию – не более 3 часов.

Показания к исследованию:острые и хронические гнойно-воспалительные заболевания мочевыводящей системы (цистит, уретрит, пиелонефрит).

При сборе мочи длябактериологического исследования (“посев на стерильность”)наружные половые органы следует обмыть кипячёной водой, т.к. попадание антисептических растворов в мочу может дать ложноотрицательные результаты. Для бактериологического исследования мочу из средней порции собирают в стерильную посуду.

Особенности ухода при различных инфекционных болезнях

При тифопаратифозных заболеваниях обращается особое внимание на строгое соблюдение санитарно-гигиенических правил и систематическое проведение текущей дезинфекции.

Уход при брюшном тифе и паратифах

Уход за тяжелыми больными с брюшным тифом и паратифами обеспечивают так же, как и за всеми другими высоколихорадящими инфекционными больными. Из числа особенностей следует отметить возможность развития острого инфекционного психоза, кишечного кровотечения и перфорации кишечника, требующих специального ухода и оказания экстренной помощи.

Инфекционный психозразвивается в разгаре заболевания. Одним из ранних признаков его является чувство тревоги, бессонница, двигательное возбуждение.

Делирий (бред)протекает с яркими галлюцинациями устрашающего характера. Больной при этом вскакивает с кровати, стремится убежать из палаты, скрываясь от мнимых преследователей, может выпрыгнуть из окна. При малейшем подозрении на развитие психоза у постели больного устанавливается индивидуальный пост с круглосуточным дежурством персонала. При сильном возбуждении больному вводят 2 мл 2,5 %-ного раствора аминазина, димедрола (1 мл 2 %-ного раствора) и сульфата магния (10 мл 25 %-ного раствора).

Перфорация кишечникаявляется одним из наиболее тяжелых осложнений брюшного тифа и паратифов, она происходит чаще всего на 3–4-й неделе болезни. Ранняя диагностика перфорации имеет большую роль. Если признаки перфорации обнаружены своевременно и срочно сделана операция, то жизнь больного оказывается в большинстве случаев вне опасности. В том случае, когда с момента перфорации проходит больше 6 ч, развивается разлитой перитонит и прогноз становится крайне тяжелым.

Кишечное кровотечениевозникает в те же сроки, что и перфорация, – появляется кровь в испражнениях, падает артериальное давление, учащается пульс, появляются резкая слабость, падение температуры. При обнаружении кишечного кровотечения больному запрещают двигаться, принимать пищу и пить воду. Над нижней частью живота подвешивают пузырь со льдом, переливают кровь, внутривенно вводят 10 %-ный раствор хлористого кальция. В течение первых 12 ч после кровотечения больного не кормят и дают лишь небольшое количество подкисленной воды, теплого сладкого чая или фруктовых соков. Затем, если кровотечение не повторяется, разрешается съесть яйцо всмятку, желе, кисель. Постепенно диету расширяют и через 4–5 дней переходят на обычное питание. За больными брюшным тифом и паратифами необходимо следить, чтобы они соблюдали постельный и диетический режим. Больному разрешается садиться только с 9–10-го дня нормализации температуры тела, вставать с постели и постепенно начинать ходить с 14–15-го дня, если нет никаких неблагоприятных симптомов. Особенно внимательными надо быть в отношении лиц пожилого возраста, страдающих хроническими сердечно-сосудистыми расстройствами. Для них срок пребывания на постельном режиме должен быть увеличен.

При обычном течении тифопаратифозного заболевания больные получают диету № 2, за 5–7 дней до выписки их переводят на общий стол. При дисфункции кишечника в разгаре заболевания больному дают в течение нескольких дней стол № 4.

В период выздоровления у больных нередко появляется резко повышенный аппетит, поэтому их необходимо сдерживать от переедания, т. к. оно может привести к дисфункции кишечника и спровоцировать рецидив болезни.

Дизентерия и другие острые диарейные кишечные инфекции

Уделяют большое внимание санитарно-гигиеническим вопросам и текущей дезинфекции, особенно в туалетах. В летнее время имеет значение борьба с мухами. Все больным, поступающим в лечебное отделение для кишечных больных, а также лицам, остающимся на домашнем лечении, и их родственникам, проживающим в одной квартире, разъясняют правила личной гигиены, в частности мытье рук с мылом после туалета, перед приемом пищи и курением.

В домашних условиях нужно научить больных и их родственников доступным методам текущей дезинфекции. Медицинская сестра обязана следить за характером стула у кишечных больных и фиксировать результаты осмотра испражнений в истории болезни. За тяжелыми больными требуется особый уход.

Недопустимо, чтобы больной находился в белье, испачканном фекалиями. Очень важно следить за поддержанием чистоты кожи в промежности и после каждой дефекации следует обмывать задний проход водой с мылом. У тяжелых кишечных больных в результате токсического расстройства терморегуляции и нарушения водно-солевого баланса резко повышается чувствительность к охлаждению. В связи с этим целесообразно согревать больных, обкладывая их грелками, особенно во время повторных ознобов.

Холера

Тяжесть течения холеры и исход болезни зависят главным образом от степени обезвоживания больного. Поэтому одной из главных задач медицинской сестры и врача является систематический точный учет количества жидкости, теряемой больным с испражнениями и рвотой, а также объема растворов, которые вводятся ему с лечебной целью. Медицинская сестра обязана строго учитывать и записывать в историю болезни состав и количество введенных больному лечебных растворов, отмечая точное время начала и конца введения, а также реакцию больного. Следующей важной задачей при уходе за холерным больным является четкое выполнение противоэпидемических мероприятий, направленных на недопущение рассеивания инфекции (соблюдение правил сбора и дезинфекции заразного материала, порядка обеззараживания белья и одежды больного, дезинфекции окружающих предметов). В остром периоде болезни при наличии диареи и тем более рвоты предлагать больному пищу нельзя, можно давать пить только солевые растворы и воду. После прекращения кишечной дисфункции назначается на 2–3 дня cтол № 4, затем стол № 13 и перед выпиской – стол № 15.

Инфекции дыхательных путей

Особенности ухода при гриппе и других респираторных заболеваниях связаны с развитием у больных тяжелого течения пневмоний, которые могут носить геморрагический характер. Больному спневмониейнужно придать в постели удобное для дыхания и работы сердца положение, приподняв подголовник кровати и подложив 2–3 подушки под голову и верхнюю часть туловища. Важно следить за чистотой и проходимостью дыхательных путей. Носовые ходы, глотку и ротовую полость необходимо систематически осматривать, освобождая от скопившейся слизи и образующихся корок. Подсохшие губы и слизистые оболочки нужно смазывать свежим несоленым сливочным маслом и глицерином. Кислород можно давать только спустя 10–15 мин после смазывания. При частой и длительной даче кислорода через носовые катетеры надо следить за тем, чтобы не травмировались слизистые оболочки носовых ходов и не образовывались пролежни. В случае развития этих осложнений или невозможности введения кислорода через нос по другим причинам следует пользоваться вместо катетеров маской. У больных респираторными инфекциями могут развиваться очень тяжелые энцефалиты и менингоэнцефалиты, при гриппе эти изменения в нервной системе носят геморрагический характер. Такие больные теряют сознание и впадают в кому, но перед этим у них нередко развивается острый психоз с галлюцинациями. У их постели обязательно устанавливается индивидуальный пост.

Ухаживая за больными в бессознательном состоянии, необходимо следить за функцией всех органов и систем, но в первую очередь обращать внимание на работу сердца и органов дыхания, делая все необходимое для улучшения их деятельности. При невритах (плечевом, поясничном) наряду с другими средствами хороший эффект оказывает местное сухое тепло в виде негорячей грелки и света от электрической лампы с рефлектором. Медицинский персонал лечебного отделения работает в масках, заменяя их через каждые 3–4 ч работы.

Скарлатина

Особенности ухода. У больных тяжелой токсической или септической формой скарлатины часто возникает рвота, особенно в начальном периоде болезни. Поэтому у постели тяжелого скарлатинозного больного нужно всегда иметь наготове емкость для сбора рвотных масс.

При уходе за такими больными следует уделять внимание состоянию ротовой полости и глотки, поддерживая их в постоянной чистоте. Для туалета рта лучше всего применять 0,5 %-ный раствор перманганата калия, 0,02 %-ный раствор фурацилина. На шею больного накладывают ватно-марлевую повязку.

Равномерное тепло, создаваемое повязкой, способствует более быстрому рассасыванию воспалительных изменений в пораженных лимфатических узлах.

При наличии геморрагической сыпи важно сделать все необходимое, чтобы кожа больного не подвергалась травмам и излишнему давлению. Для этого кровать должна быть мягкой, матрац – ровным, простыня – без складок.

У тяжелых, ослабленных больных необходимо систематически проверять места, где чаще всего образуются пролежни и опрелости, предпринимать меры их профилактики.

При уходе за больными тяжелой токсической формой скарлатины необходимо следить за функцией сердечно-сосудистой системы ввиду возможного развития острой сосудистой недостаточности, при которой необходима срочная помощь. Медицинский персонал во время работы должен иметь медицинские халаты, которые за пределы отделения выносить нельзя.

Дифтерия

При уходе за тяжелыми больными токсической и геморрагической формойдифтерии зеванеобходимо уделять большое внимание поддержанию чистоты в ротовой полости, глотке и носовых ходах, освобождая их от некротических масс, скопившейся слизи и образовавшихся корок с помощью полосканий и ватных тампонов, смоченных в дезинфицирующих растворах, но нельзя пытаться отмывать дифтерийные пленки и тем более удалять их механически – шпателем или пинцетом, т. к. это приводит к ухудшению местного процесса и усилению общего токсикоза. Больнымдифтерией гортанис явлениями невинного крупа придают в постели полусидячее положение. При стенозе II степени, тем более III степени, дают кислород с помощью носовых катетеров или маски. Если больному сделана интубация или трахеотомия, около него должна неотлучно находиться опытная медицинская сестра.

Нужно избегать всего, что может вызвать возбуждение или беспокойство больного.

Если происходит закупоривание трубки густой слизью или пленками, у больного начинает выслушиваться клокочущий дыхательный шум. В таких случаях необходимо извлечь трубку, чтобы прочистить ее или убрать совсем.

При дифтерии глаз, ушей, половых органов, ран применяется местная терапия в виде капель, примочек и мазей, содержащих антибиотики. При уходе за больными дифтерией нужно надевать вторые медицинские халаты и марлевые маски – респираторы.

Менингококковая инфекция

Наиболее тяжело протекаетменингококцемия – менингококковый сепсис(образуются кровоизлияния и очаги некроза в коже).

Вследствие токсикоза нарушается трофика кожи и слизистых оболочек, у тяжелых больных в бессознательном состоянии быстро образуются пролежни. Все это требует самого тщательного ухода за кожей и слизистыми оболочками носа, ротовой полости, глотки и конъюнктивы глаз. Необходимо систематически проводить профилактику пролежней и некрозов, не давая больному лежать подолгу, смазывая их спиртом. Применингите и менингоэнцефалитеу больных часто возникает рвота центрального происхождения. Если при этом больной находится в бессознательном состоянии, то создается угроза инспирации рвотных масс в дыхательные пути и асфиксии. Поэтому очень важно не только оказать своевременную помощь во время рвоты, но и сделать все необходимое, чтобы рвотные массы не попали в дыхательный тракт. Если это все же произошло, то нужно немедленно ввести в трахею катетер и отсосать все, что туда попало. Тяжелые больные менингококковой инфекцией испытывают сильнейшую головную боль, у них имеется повышенная чувствительность к свету и шуму, выраженная гиперстезия кожи. В связи с этим в палатах, где размещаются больные менингококковой инфекцией, необходимо особенно строго соблюдать условия охранительного режима. Довольно часто у тяжелых больных в бессознательном состоянии возникает задержка мочи в результате пареза мочевого пузыря. В таких случаях необходимо регулярно выпускать мочу с помощью катетера. При уходе за больными менингококковой инфекцией в больнице и дома необходимо пользоваться марлевой маской – респиратором.

Трансмиссионные инфекции

При поступлении больного с подозрением насыпной тифего проверяют на педикулез и в случае обнаружения вшей и гнид волосы остригаются машинкой и сжигаются. Голова больного обрабатывается раствором, уничтожающим насекомых, а через 2–3 дня при необходимости обработка повторяется. Одежда больного обрабатывается в дезинфекционных камерах. При тяжелом течении сыпного тифа развивается менингоэнцефалит, при котором отмечается сильная головная боль, возбуждение, явления психоза. Поэтому одной из основных задач при уходе за сыпнотифозными больными является постоянное наблюдение, контроль за их поведением и состоянием. Вследствие сосудистых поражений и нарушения кровообращения быстро образуются пролежни, поэтому необходимо внимательно следить за кожей у тяжелых больных и тщательно проводить профилактику пролежней. У пациентов с сыпным тифом всегда имеет место наклонность к запорам. При отсутствии стула в течение 2-х суток и вздутии кишечника следует сделать очистительную клизму.

При тяжелом течении заболевания у больных нередко возникает острая задержка мочи в связи с парезом мочевого пузыря. В таких случаях нужно выпустить мочу катетером, не допуская резкого переполнения мочевого пузыря. В остальном уход за тяжелыми больными осуществляется так же, как и при других инфекциях.

Приступмалярииобычно начинается внезапным и очень сильным (сотрясающим) ознобом. Во время озноба нужно накрыть больного одеялами и обложить негорячими грелками, поместив их к ногам и туловищу. После озноба больной начинает испытывать сильный жар. Температура тела может достигать 40 °C и больше. Грелки надо сразу же убрать и снять одеяла, оставив больного покрытым одной простыней. В этот период очень важно не допустить переохлаждения, т. к. это может привести к развитию пневмонии и других осложнений. Температура воздуха в палате должна быть в пределах 20–22 °C.

Нужно следить за тем, чтобы не было потока холодного воздуха из окон и дверей, хотя пациент и стремится уменьшить чувство жара, сбрасывая с себя одежду. Можно облегчить его самочувствие, если подвесить пузырь со льдом над лобно-теменной областью или наложить на лоб марлю, смоченную в холодной воде.

Эти несложные процедуры снижают ощущение жара и одновременно уменьшают головную боль, которая часто изнуряет больного во время малярийного приступа. Приступ малярии заканчивается, как правило, критическим падением температуры тела и обильным потоотделением. В этот момент медицинская сестра должна следить за тем, чтобы больной не лежал в мокром белье и не переохлаждался, а также необходимо своевременно заметить начальные признаки коллапса и оказать необходимую помощь в случае его развития. Особого внимания в этом отношении требуют лица старшего возраста, страдающие хроническими сердечно-сосудистыми заболеваниями. При наличии малярийных больных необходимо проводить систематическую борьбу с комарами на всей территории больницы, используя для этой цели аэрозольные инсектициды. На окнах в палате, где размещаются больные малярией, должны быть натянуты противомалярийные сетки.

Зоонозы

Чума.У больных чумой в результатетоксического пораженияцентральной нервной системы часто развивается бред галлюцинаторного характера, возбуждение, поэтому необходимо обеспечить постоянное наблюдение за ними. При уходе за тяжелыми чумными больными следует уделять большое внимание состоянию сердечнососудистой системы, т. к. именно поражение сердца и сосудов является одной из причин смерти при чуме. У больных легочной формой очень быстро развиваются одышка, цианоз и другие явления легочной недостаточности и кислородного голодания. В связи с этим больным систематически дается кислород через носовые катетеры или с помощью маски.

Ухаживая за тяжелыми чумными больными, находящимися в бессознательном состоянии, необходимо тщательно следить за чистотой ротовой полости, глотки, носовых ходов и области промежности, регулярно проводить профилактику пролежней, которые очень быстро образуются вследствие тяжелого поражения сосудов кожи. Медицинский персонал, работающий в стационаре для больных чумой, должен быть вакцинирован против этой инфекции.

Во время работы в чумном стационаре надевается специальная защитная противочумная одежда – костюм 1-го типа, который состоит из пижамы, большой косынки, длинного медицинского халата, полотенца, ватно-марлевой маски-респиратора, защитных очков, резиновых перчаток, носков, резиновых сапог. Костюм этого типа надевается при уходе за больными с легочной и септической чумой.

При уходе за больными бубонными формами разрешается снимать защитные очки и маску-респиратор, т. е. пользоваться противочумной одеждой 2-го типа. В чумном стационаре особое внимание уделяется текущей дезинфекции, дезинсекции и дератизации.

Сибирская язва.При кожной форме болезни очень важно не травмировать участки кожи, где развиваются острые воспалительные изменения, которые принято называть сибиреязвенным карбункулом. Это может привести к развитию тяжелого сепсиса с летальным исходом.

Больных следует предупредить о том, чтобы они не предпринимали попыток к вскрытию пузырьков и снятию корок с карбункулов. Одежда не должна сдавливать карбункулов и вызывать трение об их поверхность, например на шее. Медицинская сестра, собирая материал из пустул и из язв карбункулов для бактериологического исследования, а также накладывая лечебную повязку, должна делать это аккуратно, стремясь не повредить грануляционный вал на границе очага некротизирующих тканей.

Уход за тяжелыми больными легочной, кишечной и септической формами сибирской язвы не имеет каких-либо специфических особенностей и осуществляется так же, как и при других инфекционных заболеваниях, сопровождающихся поражением легких и кишечника. При заборе патологического материала с поверхности сибиреязвенного карбункула, а также при уходе за тяжелыми больными легочной, кишечной и септической формами заболевания следует надевать резиновые перчатки.

Туляремия.У тяжелых больных туляремией в начальном периоде могут появляться рвота центрального происхождения и почасовое кровотечение. Оказывая помощь при рвоте, нужно повернуть голову больного набок с наклоном вниз, поддерживая ее, следить за тем, чтобы рвотные массы не попали в дыхательные пути.

Для остановки носового кровотечения следует положить больного на спину, убрать из-под головы подушку и затампонировать носовые ходы ватой. Если, несмотря на эти мероприятия, кровотечение продолжается, надо вызвать отоларинголога для проведения задней тампонады.

При бубонной форме туляремии на область бубона накладывается согревающий спиртовой компресс или применяется сухое тепло. Это способствует более быстрому рассасыванию бубона. Тяжелому больному сангинозно-бубонной формой болезниследует регулярно проводить полоскание рта и глотки слабым дезинфицирующим раствором (0,05 %-ным перманганата калия, 0,02 %-ным фурацилина). При глазобубонной форме туляремии пораженный глаз по утрам нужно промывать теплым 1–2 %-ным раствором соды или кипяченой водой, в течение дня 2–3 раза закапывать 20–25 %-ный сульфацил натрия (альбуцид). Больным с пневмонией систематически дают кислород.

В палатах необходимо проводить дезинфекцию, засетчивать окна, двери, применять репелленты, чтобы предотвратить попадание крылатых насекомых, которые могут передавать инфекцию пациентам и животным.

Уход за инфекционными больными предусматривает в первую очередь меры по предупреждению внутрибольничной инфекции и заражения персонала: соблюдение правил противоэпидемического режима и текущей дезинфекции, правильная вентиляция палат, обеззараживание воздуха бактерицидными лампами, влажная уборка с применением химических средств, дезинфекция испражнений. Ношение масок предохраняет персонал от капельной передачи инфекции, а разобщение больных различных отделений — от переноса инфекции (см. Внутрибольничные инфекции, Дезинфекция, Изоляция инфекционных больных). Обязательным условием наблюдения за инфекционными больными является знание особенностей течения болезни, что необходимо для своевременного забора материала для лабораторных исследований и предупреждения осложнений или раннего их распознавания. Исключительного внимания требуют лихорадящие больные. В период нарастания температуры (озноб) следует согреть больного: тепло укрыть, обложить грелками, дать горячее питье. В период максимального подъема температуры необходимо обильное щелочное питье, которое нейтрализует вредные вещества в крови и тканях организма. Кризис (см.) может сопровождаться явлениями острой сердечно-сосудистой недостаточности; при этом больному необходимо оказать срочную медицинскую помощь (см. Коллапс). Необходимо тщательно следить за гигиеническим содержанием полости рта. Нередко при лечении антибиотиками могут появиться белые налеты на слизистой оболочке рта (см. Кандидоз), которые не следует механически удалять. Нарушения функции кишечника должны быть своевременно замечены медперсоналом; при изменении цвета, консистенциикала, наличии крови необходимо показать его врачу. Настойчивое и многократное ( 6 раз в сутки) кормление инфекционных больных — непременное условие ухода. Правильный режим питания имеет большое значение, особенно при заболеваниях, сопровождающихся тяжелым поражением желудочно-кишечного тракта (см.Брюшной тиф, Гепатит эпидемический, Дизентерия,Пищевые токсикоинфекции). Большая осторожность требуется при кормлении больных бешенством (см.), ботулизмом (см.),столбняком(см.) в связи с расстройством глотания. Уход за больными с особо опасными инфекциями требует специальной подготовки.

Педикулез — паразитирование вшей на человеке. При обнаружении гнид или вшей необходимо сразу же провести обработку, так как головные и платяные вши являются переносчиками различных инфекционных заболеваний.

Приготовьте: — укладку для обработки педикулезного больного; — спецодежду для медсестры (халат, косынку, перчатки); — клеенку размером 1 X 1 м; — клеенчатую и матерчатую косынки для пациента; — частый гребень; — 0,15-ный водно-эмульсионный раствор карбофоса, нитисрор и др., 6-ный раствор уксуса, ватные тампоны; мешок для белья; — лупу; — бритвенный прибор; — медицинскую карту стационарного больного; — экстренное извещение об инфекционном больном.

Технология 1 (обработка карбофосом).

1. Наденьте спецхалат, косынку, перчатки. 2. Положение больного — сидя, если позволяет состояние — на кушетке с клеенкой. 3. Волосы пациента обработайте 0,15-ным раствором карбофоса. 4. Покройте его волосы клеенчатой и матерчатой косынками. 5. Через 20 мин промойте волосы теплой водой. 6. Для ополаскивания используйте 6-ный раствор уксуса. 7. Расчешите волосы частым гребнем. 8. Белье пациента отправьте в дезинфекционную камеру в специальном мешке. 9. На титульном листе медкарты сделайте в правом верхнем углу пометку «Р» — педикулез. 10. Помещение и все, с чем контактировал педикулезный больной, обработайте карбофосом. 11. Спецодежду, в которой проводилась обработка, также сложите в мешок и отправьте на обработку. 12. Заполните экстренное извещение об инфекционном заболевании и отправьте в санэпидстанцию по месту жительства.

Технология 2 (обработка раствором нитифора).

1. Обработайте волосы пациента 0,5-ным водно-спиртовым раствором нитифора с помощью губки или ватного тампона. 2. Покройте его голову клеенчатой и матерчатой косынками. 3. Через 40 мин промойте волосы больного проточной водой с шампунем. 4. Расчешите их частым гребнем.

: кал

Способ забора.Кал собирается после самопроизвольной дефекации в одноразовый пластиковый контейнер с герметичной крышкой. Следует избегать примеси к калу мочи и отделяемого половых органов. Контейнер необходимо доставить в лабораторию в тот же день, а до отправки он должен храниться в холодильнике (3-5 ?С).

Подготовка к исследованию– рекомендована отмена лекарственных препаратов (все слабительные, ваго- и симпатикотропные средства, каолин, сульфат бария, препараты висмута, железа, ректальные свечи на жировой основе, ферменты и другие препараты, влияющие на процессы переваривания и всасывания). Нельзя проводить копрологические исследования после клизмы. После рентгенологического исследования желудка и кишечника проведение анализа кала показано не ранее, чем через двое суток. При исследовании на скрытую кровь из рациона следует исключить мясо, рыбу, помидоры, все виды зеленых овощей, препараты железа. Целесообразно применение диеты: молоко, молочные продукты, каши, картофельное пюре, белый хлеб с маслом, 1-2 яйца всмятку, немного свежих фруктов. Такую пищу дают в течение 4-5 дней, кал исследуют на 3-5 дни (при условии самостоятельного опорожнения кишечника).

Процедура взятия крови из вены для серологического исследования

Стр 1 из 2

Правила забора материала для бактериологического исследования

Результат бактериологического исследования биоматериала в значительной степени зависят от правильного взятия материала и сроков доставки его в лабораторию.

При заборе материала необходимо соблюдать следующие правила:

-взятие материала самим обследуемым не допускается, забор производится только медицинским работником;

-материал должен соответствовать характеру инфекционного процесса;

-любой материал забирается в стерильную посуду без следов дезинфицирующих средств, в количестве, достаточном для исследования;

-наилучшие результаты исследования достигаются при немедленном посеве материала после взятия его;

-при невозможности посева материала после его взятия в течение 2-3 часов следует использовать консервирующие растворы (при количестве биоматериала не более 1/3 объёма консерванта);

-при заборе материала тампоном достаточно 1 мл консерванта;

-материал для исследования следует собирать до начала антибактериальной терапии;

-доставка материала в лабораторию осуществляется в специальном металлическом футляре, биксе (в зимний период с утеплённой подкладкой);

-не допускается доставка материала в хозяйственных сумках и других упаковках личного пользования, а также в пробирках, завернутых в бумагу.

Любой биоматериал, присылаемый в лабораторию, должен иметь сопроводительный бланк-направление, в котором указываются:

-наименование учреждения или отделения, направивших материал в лабораторию;

-дата направления;

-номер медицинской карты стационарного больного;

-Ф.И.О. пациента, его возраст и место жительства;

-место работы или какое детское учреждение посещает;


-характер направленного на исследование материала (кровь, кал, моча и т.д.)

-цель обследования (с диагностической целью, профилактической, по эпидемиологическим показаниям);

-диагноз;

-кратность обследования (первичный, повторный анализ);

-дата и время забора материала;

-кто забрал материал (должность, фамилия);

-подпись лица, забравшего материал.

Направление должно быть помещено в полиэтиленовый пакет и изолировано от материала.

Процедура взятия крови из вены на гемокультуру

Показания:

-продолжительность лихорадки более 5 дней при неустановленном диагнозе;

-инфекционные заболевания, сопровождающиеся бактериемией (тифопаратифозные заболевания, сальмонеллёз, менингокцемия, иерсиниозная инфекция и др.)

Условия взятия:

-соотношение крови и среды 1:10;

-до начала назначения антибиотиков;

-при приёме больным антибактериальных препаратов необходимо указать их название, дозу и продолжительность приема.

Оснащение:

-средства индивидуальной защиты (фартук, нарукавники, перчатки, маска, очки);

-шприцы объёмом 10 и 20 мл;

-стерильный флакон с питательной средой, полученный в бактериологической лаборатории к моменту забора крови;

-стерильные салфетки и шарики;

-дезинфектант (йодсодержащий или спиртосодержащий);

-жгут резиновый, клеенчатая подушечка;

-лоток чистый и для отработанного материала;

-ёмкости с дезрастворами;

-пинцет для снятия иглы;

-спиртовка, спички;

-контейнер для транспортировки крови.

Алгоритм взятия крови:

1.За день до исследования заказать в баклаборатории флаконы с питательной средой.

2.Установить доброжелательные отношения с пациентом.

3.Объяснить пациенту цель и ход исследования, получить его согласие.

4.Помыть руки и обработать их антисептиком.

5.Надеть перчатки, фартук, нарукавники, маску, защитные очки.

6.Подготовить манипуляционный столик к работе.

7.Усадить или уложить больного на спину, подложить под локоть клеёнчатую подушечку.

8.Попросить пациента максимально разогнуть руку.

9.Наложить жгут на верхнюю треть плеча.

10.Проверить наличие пульса на лучевой артерии. Попросить пациента поработать кистью, а затем сжать кисть в кулак.

11.Обработать руки в перчатках антисептиком.

12.Взять 3 стерильных шарика и смочить их йод- или спиртсодержащим раствором. Обработать одним шариком пункционное поле широко, вторым — узко, третий шарик положить на место предполагаемой пункции.

13.Взять шприц в правую руку, а левой захватить шарик с предполагаемого места пункции и поместить его между четвертым и пятым пальцами кисти.

14.Большим пальцем левой руки зафиксировать вену.

15.Пунктировать вену и набрать в шприц 10 или 20 мл крови, учитывая соотношение крови и среды 1:10.

16.Развязать жгут. Попросить пациента разжать кулак, положить на место пункции шарик и быстрым движением выйти из вены.

17.Прижать ватку со спиртом в месте инъекции.

18.Согнуть руку больного в локтевом суставе на 3-5 минут.

19.Снять пинцетом использованную иглу и поместить в ёмкость с дезраствором.

20.Помощник должен зажечь спиртовку. Снять с флакона со средой пробку с бумажным колпачком. Обжечь горлышко флакона со средой и шприц в пламени спиртовки.

21.Медленно перелить кровь из шприца во флакон со средой.

22.Обжечь горлышко флакона со средой и пробку.

23.Закрать флакон пробкой и бумажным колпачком.

24.Загасить спиртовку.

25.Снять шарик с руки пациента.

26.Использованные шарики замочить в контейнере с дезинфектантом.

27.Флакон поместить в контейнер для транспортировки крови.

28.Руки вымыть под проточной водой с мылом.

29.Поместить направление в полиэтиленовый пакет.

30.Контейнер и отдельно полиэтиленовый пакет с направлением транспортировать в лабораторию.

31.Снять с себя маску, очки, нарукавники, передник, перчатки. Перчатки замочить в дезрастворе.

32.Вымыть и осушить руки.

Примечание:

-манипуляцию проводить утром натощак;

-пробирка для забора крови должна быть не только стерильной, но и сухой (для избежания гемолиза эритроцитов);

-запрещается производить забор крови без шприца, только иглой.

В пользу наличия в крови возбудителей заболевания свидетельствуют:

-повторное выделение одних и тех же микроорганизмов;

-обильный рост микробов при проведении количественных исследований.

В пользу контаминации (загрязнения) образца крови посторонними микроорганизмами после взятия материала свидетельствуют:

-выделение небольшого количества нескольких видов микроорганизмов;

-наличие представителей нормальной микрофлоры (особенно микрофлоры кожи) только в одной пробе.

Процедура взятия крови из вены для серологического исследования

Показания:

-определение титра антител при бактериальных или вирусных инфекциях, чаще всего начиная с конца первой недели заболевания в динамике болезни по типу парных сывороток;

-постановка серологических реакций при диспансерном наблюдении за реконвалисцентами для верификации перенесённых заболеваний (особенно маркёров вирусных гепатитов).

Оснащение:

-средства индивидуальной защиты (фартук, нарукавники, перчатки, маска, очки);

-шприцы объёмом 5 и 10 мл;

-сухие чистые пробирки с резиновыми пробками;

-стерильные салфетки и шарики;

-дезинфектант (йодсодержащий или спиртосодержащий);

-жгут резиновый, салфетка, клеёнчатая подушечка;

-лоток чистый и для отработанного материала;

-ёмкости с дезрастворами;

-штатив для пробирок;

-контейнер для транспортировки крови;

-бланк-направление в лабораторию.

Алгоритм взятия крови:

1.Подготовьте шприц, иглы, ватные шарики, салфетки, спирт, стерильную сухую пробирку, штатив для пробирок, лоток.

2.Выпишете направление в баклабораторию.

3.Установите доброжелательные отношения с пациентом и объясните цель исследования.

4. Помойте руки и обработайте их антисептиком.

5.Наденьте перчатки, фартук, нарукавники, маску, защитные очки.

6.Усадите или уложите больного на спину.

7.Расположите руку пациента ладонной поверхностью вверх, подложив под локоть клеёнчатую подушечку или валик.

8.Наложите жгут на верхнюю треть плеча.

9. Попросите пациента поработать кистью, а затем сжать кисть в кулак.

10.Обработайте локтевой сгиб спиртом дважды.

11.Введите иглу в вену и наберите 5 мл крови.

12.Снимите жгут и приложите к месту укола шарик со спиртом.

13.Быстрым движением выйдите из вены и перелейте кровь из шприца в пробирка медленно по стенке.

14.Закройте пробирку резиновой пробкой, пронумеруйте и поместите пробирку в штатив.

15.Установите штатив в металлический контейнер (пенал, бикс).

16.Отправьте кровь и направление в лабораторию.

17.Заберите тампон у пациента, убедившись, что кровь из места пункции вены не выделяется.

18.Поместите тампоны в ёмкость с дезраствором.

19.Проведите дезинфекцию использованного инструментария и оснащения.

20.Снимите с себя маску, очки, нарукавники, передник, перчатки. Перчатки замочите в дезрастворе.

21.Вымойте и осушите руки.

Примечание:

-кровь для серологического исследования необходимо брать натощак или через 6 часов после приёма пищи;

-пробирка для забора крови должна быть химически чистой, сухой(для устранения гемолизы эритроцитов, затрудняющего определить степень помутнения сыворотки при взаимодействии антигена с антителом);

-запрещается проводить забор крови без шприца, только иглой.

Серологическое исследование крови

Что такое серологическое исследование крови?

Объект серологии — антигены и антитела

Серологическое исследование (СИ) основано на способности антигенов и антител связываться друг с другом. СИ позволяет с точностью выявить наличие у пациента определённого вируса либо бактерии, группу крови и резус, реактивность организма к антибиотикам, аутоиммунные заболевания, гормональные нарушения, индивидуальную специфичность белков, определить эффективность терапии.

Система иммунитета борется с проникающими в организм болезнетворными микробами (антигенами) при помощи антител, при этом создавая к каждому из вирусов, паразитов либо бактерий свой определённый тип защиты.

Антиген и антитело подходят друг другу как замочная скважина и ключ, при встрече они непременно связываются. Эта серологическая реакция позволяет выявлять различные виды антител либо антигенов.

Способность иммунитета вырабатывать особые вещества, нейтрализующие вредоносные частицы, была известна учёным давно. Но увидеть реакцию антиген-антитело в лабораторных условиях удалось только в конце XIX века. Было обнаружено, что в результате образования связки, комплексы выпадают в осадок, образуя хлопья либо помутнение. Такие реакции получили названия агглютинации и преципитации. В XX веке серология — наука о свойствах сыворотки, стремительно развивалась, обнаруживались новые методы диагностирования на основе реакций антиген-антитело. На сегодняшний день существует множество способов выявления иммунных комплексов, а СИ являются незаменимым звеном в диагностике, лечении, создании новых медицинских препаратов и вакцин.

Показания к проведению анализа.

Серологические исследования широко применяется в акушерстве

Серологические исследования сопровождают современного человека на протяжении всей жизни. Первые анализы на выявление определённых антител проводятся, когда малыш находится ещё в утробе. Беременная женщина сдаёт кровь на различные СИ для определения возможного резус-конфликта либо инфекций, способных навредить вынашиваемому плоду. Когда ребёнок появляется на свет, его ожидают серологические исследования, позволяющие диагностировать врождённые заболевания. Впоследствии анализы сдаются по следующим причинам:

  • вирусные, бактериальные, паразитарные инфекции;
  • выявление активности, стадии развития болезни;
  • гормональные патологии;
  • бесплодие;
  • аутоиммунные заболевания;
  • нарушение обмена веществ;
  • аллергии;
  • онкологические заболевания;
  • планирование беременности, период вынашивания, патологии беременных;
  • выявление ревматоидного фактора;
  • определение группы крови и резус-фактора;
  • эффективность терапии при различных болезнях;
  • эффективность вакцинации;
  • предоперационный и постоперационный период при необходимости оценки уровня некоторых антител;
  • изучение иммунного состояния организма.

Подготовка к исследованию.

Прием препаратов желательно отменить накануне теста

Так как серологические исследования охватывают широкий спектр анализов, в каждом конкретном случае может понадобиться определённая подготовка, но существуют общие правила сдачи серологического теста:

  • За сутки до исследования следует ограничить в рационе жирное и жареное, исключить алкоголь.
  • Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до анализа.
  • В день сдачи крови не следует употреблять кофе, чай либо иные напитки. Можно в небольшом количестве пить чистую воду.
  • Лекарственные средства перед анализом исключаются. Если приём отменить невозможно, необходимо предоставить врачу полный перечень препаратов, в том числе витаминов, пероральных контрацептивов.
  • Все другие исследования либо медицинские манипуляции проводятся после СИ.
  • Курение рекомендуется прекратить за 12 часов до взятия образца крови.
  • В предыдущий день следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, а перед исследованием желательно 15 минут посидеть в полном покое.
  • СИ назначаются на утреннее время и сдаются натощак.

Методы проведения серологического исследования.

В серологии может применяться большое число методов

Все методики определения комплексов антиген-антитело (Аг-Ат) основываются на использовании известного Аг либо Ат в поиске неизвестного. Если необходимо обнаружить Аг, необходимы диагностические иммунные сыворотки с содержанием специфических Ат. Если целью СИ является выявление Ат, используются диагностикумы — взвеси, содержащие определённые Аг.

Серологические анализы могут отражать качественный либо количественный результат. При качественном исследовании итог может быть отрицательный или положительный, то есть искомый элемент либо обнаружен, либо нет. Количественный итог выражается в виде числового значения либо знаками «+» (обычно от одного до четырёх).

Непрямая гемагглютинация — один из методов диагностики

Методы серологических исследований:

  • Агглютинация. Связывание Ат с Аг с последующим формированием хлопьев либо осадка. Применяются прямые, непрямые, развёрнутые, ориентировочные реакции, позволяющие выявить антитела в сыворотке.
  • Гемагглютинация. Используются эритроциты с адсорбированными на них Аг либо Ат, которые склеиваются с соответствующими Ат и Аг. Образуемые комплексы выпадают в виде фестонного осадка.
  • Преципитация. Образование комплекса Аг-Ат с последующим осаждением в виде помутнения, именуемого преципитатом.
  • Коагглютинация. Выявление Аг при помощи Ат, адсорбированных на белке клеток стафилококка.
  • Торможение гемагглютинации. Ат иммунной сыворотки подавляют вирусные Аг, в итоге вирусы теряют способность склеиваться с эритроцитами.
  • Непрямая реакция Кумбса. Определяются Ат к поверхностным Аг эритроцитов.
  • Кольцепреципитация. Проводится на основе иммунной сыворотки с наслоением растворимого Аг.
  • Двойная радиальная иммунодиффузия. Реакция основана на диффундировании компонентов антисыворотки и Аг в лунках агара либо агарозы.
  • Реакция связывания комплемента. Связь Аг и Ат сопровождается адсорбцией комплемента, в качестве индикатора используются эритроциты барана и Ат к ним в составе гемолитической сыворотки.
  • Нейтрализация. Основана на нейтрализации вирусного агента антителами.
  • Реакции, основанные на маркировании Ат и Аг флуоресцентным либо ферментным составом — иммунофлюорисцентный (РИФ) и иммуноферментный (ИФА) методы.

Иммунофлюорисцентный метод.

«Свечение» в темнопольном микроскопе

Данный метод основан на использовании Ат, меченных флуоресцентным веществом. Чаще всего в качестве метки используется флуоресцеинизотиоционат, обладающий зелёным свечением в лучах ультрафиолета. Результат анализа оценивается по степени яркости свечения. Может быть использован ручной метод определения при помощи люминесцентного микроскопа, оптического микроскопа с люминесцентной насадкой, а также автоматический способ с применением микрочипового цитомера, проточного цитомера либо роботизированного флуоресцентного микроскопа.

РИФ проводится прямым и непрямым методом. Прямой способ означает непосредственное связывание сорбированного Аг с меченым Ат. Непрямой метод подразумевает использование немаркированных Ат для связки с Аг, а затем добавление меченых Ат, что позволяет избежать неспецифических реакций.

Иммуноферментный анализ.

Иммуноферментный анализ как метод серологической диагностики

ИФА основан на выявлении комплексов Аг-Ат при помощи маркирования одного из компонентов. В качестве метки используются различные ферменты, которые в результате ферментативной реакции образуют окрашивание. Существуют разнообразные методы ИФА, их можно классифицировать как гомогенные и гетерогенные методы.

Гомогенные означают, что все этапы реакции происходят в растворе.

Гетерогенные методы включают разделение на фазы с использованием твёрдого носителя.

Гомогенно-гетерогенные способы основываются на том, что комплексы Аг-Ат формируются в растворе, а затем для разделения используется твёрдая фаза.

Принцип «сэндвич»-метода

Существует множество вариаций методов ИФА, некоторые из них представлены ниже.

  1. Сэндвич-метод. К иммобилизованным Ат добавляется раствор с Аг, после образования комплексов носитель отмывают от лишних компонентов и добавляют маркированные Ат. В результате, Аг оказываются зажатыми иммобилизованными и мечеными Ат, откуда и произошло название метода.
  2. Неконкурентный непрямой ИФА. К иммобилизованным Аг присоединяют исследуемую сыворотку с Ат. Когда образуются комплексы, лишние Ат смывают и добавляют маркированные Ат, способные связаться с прикреплёнными к поверхностям лунок иммунными комплексами.
  3. Конкурентный прямой ИФА. К иммобилизованным Аг вносят исследуемую сыворотку и конъюгат, содержащий маркированные Ат. Формируются комплексы Аг-Ат нескольких видов: с мечеными Ат и с немаркированными Ат, которые вступают между собой в конкуренцию за связь с Аг.

Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование.

Серологическая диагностика позволяет выявить возбудителя

СИ позволяют выявить определённое заболевание при наличии на него подозрения, то есть в основе анализа лежит знание того, какой именно элемент необходимо искать.

Если у пациента присутствует определённая симптоматика либо иные исследования указывают на заболевание, назначается серологический анализ.

Серологические исследования используют для диагностики следующих инфекций:

Серологические исследования способны выявить любые инфекции в лабораторных условиях, если в наличии есть Аг возбудителя инфекции.

Преимущества серологического метода исследования в диагностике инфекций.

Серологическая диагностика — быстро и доступно

  1. Высокая чувствительность и специфичность.
  2. Широкий спектр определяемых инфекций.
  3. Ранняя диагностика инфицирования.
  4. Возможность мониторинга развития заболевания.
  5. Быстрота и удобство в исполнении.
  6. Возможность использования минимального объёма исследуемого материала.
  7. Безопасность исследования.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (лат. serum сыворотка + греч. logos учение) — методы иммунологии, изучающие специфические свойства крови человека или животных с целью выявления антигенов или антител с помощью серологических реакций.

С. и. широко используются в медицине для лаб. диагностики инфекционных и паразитарных болезней, определения группы крови и тканевых антигенов, видовой принадлежности белка, распознавания аутоиммунных болезней, нек-рых видов патологии беременных, гормональных нарушений, реактивности организма к антибиотикам и изучения многих других вопросов. Установление диагноза с помощью С. и. называют серодиагностикой (серологической диагностикой).

Начало С. и. положено в конце прошлого столетия, после того как было установлено, что соединение антигена с антителом (см. Антиген — антитело реакция) сопровождается рядом доступных визуальному наблюдению феноменов — агглютинацией (см.), преципитацией (см.) или лизисом. Появилась возможность специфического распознавания антигенов (см.) или антител (см.), если один из этих компонентов известен.

В 1897 г. Ф. Видаль сообщил, что сыворотка крови больных брюшным тифом избирательно агглютинирует брюшнотифозные бактерии и поэтому эта реакция (см. Видаля реакция) может быть применена для лаб. диагностики брюшного тифа. В том же году было показано, что фильтраты культур чумных, брюшнотифозных и холерных бактерий при соединении с соответствующими иммунными сыворотками образуют хлопья, или преципитат.

Реакция преципитации оказалась пригодной для обнаружения любых белковых антигенов. В 1900—1901 гг. К. Ландштейнер нашел, что в эритроцитах людей имеются два различных антигена (А и В), а в сыворотках крови два агглютинина (а и Р), что способствовало применению реакции гемагглютинации для определения групп крови (см.).

Открытие Ж. Борде в 1898 г. комплемента (см.), в присутствии к-рого иммунные антиэритроцитар-ные сыворотки приобретали способность лизировать эритроциты, позволило разработать реакцию связывания комплемента (см.), широко используемую в инфекционной и неинфекционной иммунологии.

Начиная с 40-х гг. 20 в. в серологических исследованиях стали применять иммунохихмические методы, а именно метку антител флюорохромами (см. Иммунофлюоресценция), изотопами (см. Радиоиммунологический метод) или ферментами (см. Энзим-иммунологический метод). Это способствовало значительному повышению чувствительности серол. реакций, т. е. возможности выявления минимальных количеств антигенов или антител. Серол. реакции различаются по способности выявлять отдельные виды антител. Реакция агглютинации, напр., хорошо выявляет IgM-антитела, но менее чувствительна для обнаружения IgG-антител. Реакции связывания комплемента и гемолиза (см.), к-рые требуют участия комплемента, не выявляют антитела, не присоединяющие комплемент, напр. IgA-антитела и IgE-антитела. В реакции нейтрализации вирусов участвуют лишь антитела, направленные против антигенных детерминант поверхности вириона, связанных с патогенностью (напр., белок gp 56 вируса венесуэльского энцефаломиелита лошадей).

Основные типы серологических реакций

Реакции, основанные на феномене агглютинации

Реакция агглютинации бактерий с использованием соответствующей антибактериальной сыворотки — наиболее простая серол. реакция. Взвесь бактерий добавляют к различным разведениям испытуемой сыворотки крови и через определенное время контакта при t° 37° регистрируют, при каком наивысшем разведении сыворотки крови происходит агглютинация. Реакцию агглютинации бактерий используют для диагностики многих инф. болезней; бруцеллеза, туляремии, брюшного тифа и паратифов, бациллярной дизентерии (см. Райта реакция, Хаддлсона реакция), сыпного тифа (см.. Вейля — Феликса реакция).

Реакция агглютинации для определения группы крови и резус-фактора применяется в акушерской практике, при гемотрансфузиях и трансплантации тканей. Антитела против резус-фактора (см.) представляют собой неполные антитела, они не способны к прямой реакции с резус-положительными эритроцитами, поэтому для их обнаружения используют реакцию Кумбса (см. Кумбса реакция), основанную на выявлении неполных антител с помощью антиглобулиновых сывороток. К эритроцитам известной специфичности добавляют исследуемую сыворотку крови, а вслед за этим антиглобулиновую сыворотку против IgG (непрямая реакция Кумбса). Fab-фрагменты неполных антител исследуемой сыворотки крови присоединяются к эритроцитам, а к свободным Fc-фрагментам этих антител присоединяются антитела против IgG, и происходит агглютинация эритроцитов. Для диагностики гемолитической анемии используют прямую реакцию Кумбса, В организме таких больных эритроциты соединяются с циркулирующими в крови антителами против резус-фактора. Чтобы их выявить, к эритроцитам, взятым у больного, добавляют антитела против IgG. Появление агглютинации эритроцитов подтверждает диагноз болезни.

Реакция торможения гемагглютинации — РТГА (см. Гемагглютинация) — основана на феномене предотвращения (торможении) иммунной сывороткой гемагглютинации эритроцитов вирусами. Феномен вирусной гемагглютинации не является серол. реакцией и происходит в результате соединения вируса с рецепторами эритроцитов, однако РТГА представляет собой серологическую реакцию, используемую для выявления и титрования противовирусных антител. РТГА — основной метод серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители к-рых обладают гемагглютинирующими свойствами.

Реакция пассивной, или непрямой, гемагглютинаций, В ней используют эритроциты или нейтральные синтетические хчатериалы (напр., частицы латекса), на поверхности к-рых сорбированы антигены (бактериальные, вирусные, тканевые) или антитела (см. Бойдена реакция). Агглютинация их происходит при добавлении соответствующих сывороток или антигенов. Эритроциты, сенсибилизированные антигенами, называют антигенным эритроцитарным диагностикумом и используют для выявления и титрования антител. Эритроциты, сенсибилизированные антителами, называют иммуноглобулиновыми эритроцитарными диагностикумами (см.) и используют для выявления антигенов:

Реакция пассивной гемагглютинации применяется для диагностики заболеваний, вызванных бактериями (брюшной тиф и паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), простейшими (малярия) и вирусами (грипп, аденовирусные инфекции, клещевой энцефалит, крымская геморрагическая лихорадка и др.). Реакция пассивной гемагглютинации по чувствительности не уступает методу выделения вируса при ареновирусных болезнях (см.), в частности при лимфоцитарном хориоменингите. Вирусный антиген лимфоцитарного хориоменингита выявляется у вирусоносителей (домовых мышей) в реакции пассивной гемагглютинации с суспензиями извлеченных органов, разведенными в десятки тысяч раз. При сальмонеллезе в реакции пассивной гемагглютинации определяются бактерии при концентрации до нескольких сотен микробных тел в 1 г фекалий, дизентерийные бактерии в пищевых продуктах выявляются при содержании в 1 г материала не менее 500 микробных тел.

Реакция пассивной гемагглютинации используется в диагностике и профилактике вирусного гепатита В. В Советском Союзе для выявления HBs-антигена (см. Австралийский антиген) в крови больных с острым гепатитом В производится диагностикум, представляющий собой эритроциты кур, сенсибилизированные козьим иммуноглобулином против HBs-антигена. Каплю диагностикума соединяют с равным объемом сыворотки крови обследуемых людей, и, если в ней присутствует HBs-антиген, происходит агглютинация. Реакция способна уловить до 1,5 нг/мл HBs-антигена. Для обнаружения HBs-антител используют эритроциты с сорбированным на них HBs-антигеном, выделенным из крови больных. Реакцию пассивной гемагглютинации применяют также для выявления повышенной чувствительности больного к лекарственным препаратам и гормонам, напр, пенициллину или инсулину. В этом случае эритроциты 0 группы крови человека сенсибилизируют лекарственным веществом и затем используют для выявления к нему агглютининов в сыворотке крови больного.

Реакцию пассивной гемагглютинации используют для выявления гонадотропного гормона в моче с целью установления беременности (см. Хорионический гонадотропин). Для этого стандартная сыворотка к этому гормону инкубируется с исследуемой мочой. При последующем добавлении эритроцитов с сорбированным на них гормоном агглютинация не наступает (положительный ответ), т. к. содержащийся в моче гормон нейтрализовал агглютинирующие антитела.

Реакции, основанные на феномене преципитации

Их используют для определения самых разнообразных антигенов и антител. Простейшим примером качественной реакции является образование непрозрачной полосы преципитации на границе наслоения антигена на антитело в пробирке. Широко применяются различные разновидности реакции преципитации в полужидких гелях агара или агарозы (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлоню, метод радиальной иммунодиффузии, иммуноэлектрофорез), к-рые носят одновременно качественный и количественный характер (см. Иммунодиффузия, Иммуноэлектрофорез).

Для постановки двойной иммунодиффузии наливают слой растопленного геля на стеклянную пластинку и после затвердевания вырезают лунки диаметром 1,5—3 мм. В расположенные по кругу лунки помещают исследуемые антигены, а в центральную лунку — иммунную сыворотку известной специфичности. Диффундируя навстречу друг другу, гомологичные сыворотки и антигены образуют преципитат. При радиальной иммунодиффузии (по методу Манчини) иммунную сыворотку вносят в агар. Антиген, помещенный в лунки, диффундирует через агар, и в результате преципитации с иммунной сывороткой вокруг лунок образуются непрозрачные кольца, внешний диаметр к-рых пропорционален концентрации антигена. Модификацию этой реакции используют в диагностике гриппа для распознавания IgM- и IgG-антител (см. Иммуноглобулины). В агар вносят гриппозный антиген, а в лунки сыворотки крови. Затем пластины обрабатывают иммунными сыворотками против IgM- или IgG-антител, что способствует выявлению реакции соответствующих антител с антигенами. Метод позволяет одновременно определять титры антител и принадлежность их к определенному классу иммуноглобулинов.

Разновидностью иммуноэлектрофореза является радиоиммунофорез. В этом случае после электрофоретического разделения антигенов в канавку, вырезанную параллельно движению антигенов в геле, наливают сначала меченную радиоактивным йодом иммунную сыворотку против определяемых антигенов, а затем иммунную сыворотку против IgG-антител, к-рая преципитирует образовавшиеся комплексы антитела с антигеном. Все несвязавшиеся реагенты вымывают, а комплекс антиген — антитело обнаруживают методом авторадиографии (см.).

Реакции с участием комплемента. Реакции с участием комплемента (см.) основаны на способности субкомпонента комплемента Cl(Clq) и затем других компонентов комплемента присоединяться к иммунным комплексам.

Реакция связывания комплемента позволяет титровать антигены или антитела по степени фиксации комплемента комплексом антиген — антитело. Эта реакция состоит из двух фаз: взаимодействия антигена с испытуемой сывороткой крови (исследуемая система) и взаимодействия гемолитической сыворотки с бараньими эритроцитами (индикаторная система). При положительной реакции в исследуемой системе происходит связывание комплемента, и тогда при добавлении сенсибилизированных антителами эритроцитов не наблюдается гемолиза (см. Реакция связывания комплемента). Реакция широко применяется для серодиагностики висцерального сифилиса (см. Вассермана реакция) и вирусных инфекций (см. Вирусологические исследования).

Цитолиз. Антитела против клеточных структур могут при участии комплемента растворять клетки, несущие эти структуры. Лизис эритроцитов легко оценивать по степени и интенсивности освобождения гемоглобина. Лизис нуклеарных клеток оценивают путем подсчета процента мертвых клеток, к-рые не окрашиваются метиленовым синим. Часто также используют радиоактивный хром, к-рый предварительно химически связывают с клетками. Число разрушенных клеток определяют по количеству несвязанного хрома, освобождающегося при лизисе клеток.

Реакция радиального гемолиза эритроцитов может протекать в геле. Взвесь эритроцитов барана помещают в агарозный гель, добавив туда комплемент; в застывшем на стекле слое делают лунки и вносят в них гемолитическую сыворотку. Вокруг лунок в результате радиальной диффузии антител будет образовываться зона гемолиза. Радиус зоны гемолиза прямо пропорционален титру сыворотки. Если сорбировать на эритроцитах какой-либо антиген, напр, гликопротеиновый гемагглютинин вируса гриппа, краснухи или клещевого энцефалита, то можно воспроизвести феномен гемолиза иммунными сыворотками к этим вирусам. Реакция радиального гемолиза в геле нашла применение в диагностике вирусных инфекций благодаря простоте постановки, нечувствительности к сывороточным ингибиторам, возможности титровать сыворотки крови по диаметру зоны гемолиза, не прибегая к серийным разведениям.

Иммунное прилипание. Эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови имеют на поверхности рецепторы к третьему компоненту комплемента (C3). Если к антигену (бактерии, вирусы и др.) добавить соответствующую иммунную сыворотку и комплемент, то образуется комплекс антиген — антитело, покрытый C3-компонентом комплемента. При смешивании с тромбоцитами благодаря C3-компоненту комплемента комплекс антиген — антитело осядет на клетках и вызовет их агглютинацию (см. Иммунное прилипание). Эта реакция применяется для определения антигенов системы HLA (см. Иммунитет трансплантационный) и при изучении ряда вирусных -инфекций (клещевой энцефалит, лихорадка денге), к-рые сопровождаются иммунопатол. процессами и циркуляцией в крови вирусных антигенов в комплексе с антителами.

Реакция нейтрализации основана на способности антител нейтрализовать нек-рые специфические функции макромолекулярных или растворимых антигенов, напр, активность ферментов, токсины бактерий, болезнетворность вирусов. В бактериологии эта реакция используется для обнаружения антистрептолизинов, антистрептокиназы и антистафилолизинов. Реакцию нейтрализации токсинов можно оценивать по биол. эффекту, так, напр., титруют антистолбнячные и антиботулинические сыворотки (см. Токсин — антитоксин реакция). Смесь токсина с антисывороткой, введенная животным, предотвращает их гибель. Различные варианты реакции нейтрализации применяют в вирусологии. При смешивании вирусов с соответствующей антисывороткой и введении этой смеси животным или в клеточные культуры патогенность вирусов нейтрализуется.

Реакции с использованием химических и физических меток

Иммунофлюоресценция, разработанная Кунсом (А. Н. Coons) в 1942 г., заключается в использовании для серол. реакций меченных флюорохромом сывороток (см. Иммунофлюоресценция). Меченная флюорохромом сыворотка образует с антигеном комплекс антиген — антитело, к-рый становится доступным наблюдению под микроскопом в ультрафиолетовых лучах, возбуждающих свечение флюорохрома. Реакцию прямой иммунофлюоресценции используют для изучения клеточных антигенов, выявления вируса в зараженных клетках и обнаружения бактерий и риккетсий в мазках. Так, для диагностики бешенства отпечатки кусочков мозга животных, подозреваемых на вирусоносительство, обрабатывают люминесцирующей антирабической сывороткой. При положительном результате в протоплазме нервных клеток наблюдаются глыбки ярко-зеленого цвета. На обнаружении антигенов вирусов в клетках отпечатков со слизистой оболочки носа основана экспресс-диагностика гриппа, парагриппа и аденовирусной инфекции.

Более широко применяется метод непрямой иммунофлюоресценции, основанный на выявлении комплекса антиген — антитело с помощью люминесцирующей иммунной сыворотки против IgG-антител и используемый для обнаружения не только антигенов, но и титрования антител. Метод нашел применение в серодиагностике герпеса, цитомегалип, лихорадки Ласса. В лаборатории должен храниться при г°—20° запас препаратов антигенсодержащих клеток, напр, выращенные на кусочках тонкого стекла и зараженные вирусом клетки VERO или куриные фибробласты, зафиксированные ацетоном. На препараты наслаивают исследуемую сыворотку крови, помещают препарат в термостат при f 37° для образования иммунных комплексов, а затем после отмывания несвязавшихся реагентов выявляют эти комплексы меченой люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Применяя меченые иммунные сыворотки против IgM-или IgG-антител, можно дифференцировать тип антител и обнаруживать ранний иммунный ответ по наличию IgM-антител.

Иммунофлюоресценция широко используется не только в бактериологии, вирусологии, паразитологии, но и в иммунопатологии (см.) для обнаружения гуморальных антител к тканевым антигенам человека: митохондриям, гладкой мускулатуре, клеткам желудка.

В энзим — иммунологическом методе применяют антитела, конъюгированные с ферментами, гл. обр. пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой. Чтобы обнаружить соединение меченой сыворотки с антигеном, добавляют субстрат, разлагающийся присоединенным к сыворотке ферментом с появлением окрашивания в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфатаза) цвет. Используют также ферменты, разлагающие не только хромогенный, но и люмогенный субстрат. В этом случае при положительной реакции появляется свечение. Подобно иммунофлюоресценции, энзимиммунологический метод применяют для обнаружения антигенов в клетках или титрования антител на антигенсодержащих клетках.

Наиболее популярной разновидностью энзим-иммунологического метода является иммуносорбция. На твердом носителе, к-рым могут быть целлюлоза, полиакриламид, декстран и различные пластмассы, сорбируют антиген. Чаще носителем служит поверхность лунок микропанелей. В лунки с сорбированным антигеном вносят исследуемую сыворотку крови, затем меченную ферментом антисыворотку и субстрат. Положительные результаты учитывают по изменению цвета жидкой среды. Для обнаружения антигенов на носитель сорбируют антитела, затем вносят в лунки исследуемый материал и проявляют реакцию меченной ферментом антимикробной сывороткой.

Радиоиммунологический метод основан на применении радиоизотопной метки антигенов или антител. Первоначально он был разработан как специфический метод измерения уровня циркулирующих в крови гормонов. Тест-системой являлся меченный изотопом гормон (антиген) и антисыворотка к нему. Если к такой антисыворотке добавить материал, содержащий искомый гормон, то он свяжет часть антител, при последующем внесении меченого титрованного гормона с антителами свяжется уменьшенное по сравнению с контролем его количество. Результат оценивают по сопоставлению кривых связанной и несвязанной радиоактивной метки. Эта разновидность метода носит название конкурентной реакции. Существуют и другие модификации радиоиммунологического метода. Радиоиммунологический метод — наиболее чувствительный метод определения антигенов и антител, используемый для определения гормонов, лекарственных веществ и антибиотиков, для диагностики бактериальных, вирусных, риккетсиозных, протозойных заболеваний, исследования белков крови, тканевых антигенов.

Сравнительная характеристика и использование методов серологических исследований в медицинской практике

Методы С. и. непрерывно совершенствуются в направлении повышения чувствительности и универсальности использования. Изначально серол. диагностика основывалась на выявлении антител. С появлением в середине 20 в. реакций иммунофлюоресценции и пассивной гемагглютинации, обладающих большей чувствительностью, появилась возможность обнаруживать не только антитела, но и антиген непосредственно в материале от больных. Энзим-иммунологический и радиоиммунологический методы, по чувствительности на 2—3 порядка превышающие иммунофлюоресценцию и пассивную гемагглютинацию, приближаются к методам биол. обнаружения бактерий и вирусов. Область их применения для обнаружения как антигенов, так и антител теоретически не ограничена.

Серодиагностика инф. болезней базируется на появлении антител к выделенному или предполагаемому возбудителю независимо от того, был ли обнаружен возбудитель в острой стадии болезни. Исследуют пары сывороток крови, взятых в начале болезни и 2—3 нед. спустя. Прирост антител во второй сыворотке крови не менее чем в 4 раза по сравнению с первой является диагностически значимым. Имеет также значение, каким классом иммуноглобулинов представлены антитела. IgM-антитела обнаруживают в конце острого периода болезни и в ранней стадии реконвалесценции. IgG-антитела появляются в более поздние сроки реконвалесценции и циркулируют долго. Если у женщины в первом триместре беременности обнаруживают IgM-антитела к вирусу краснухи, то это служит основанием для прерывания беременности, т. к. в этот период плод особенно чувствителен к вирусу. При разных инф. болезнях избирательно используют наиболее специфические и удобные в исполнении методы.

С. и. широко применяют в эпидемиологии. Систематический сбор и исследование образцов крови различных групп населения позволяют уяснить контакты населения с источником возбудителей инф. болезней. Изучение уровня коллективного иммунитета позволяет выявлять группы повышенного риска и планировать прививочные мероприятия, изучать географическое распространение инфекций. С. и. различных возрастных групп населения позволили, напр., ретроспективно выявить циркуляцию разных вариантов вируса гриппа в определенные периоды времени.

С. и. имеют большое значение в изучении наследственных болезней (см.) и аутоиммунных болезней, сопровождающихся появлением ткане- и органоспецифических антител, разрушающих соответствующие клетки-мишени, а также в онкологии для обнаружения опухолевых антигенов. Так, иммунодиагностика рака печени основана на определении в сыворотке крови больных альфа-фетопротеина и других эмбриональных антигенов методом иммунодиффузии и радиоиммунологическим методом.

Значительный прогресс науки в изучении тонкой антигенной структуры клеточных антигенов, антигенов бактерий и вирусов достигается благодаря применению в серол. реакциях моноклональных антител, к-рые можно получать к отдельным детерминантам антигена.

См. также иммунодиагностика.

С. Я. Гайдамович.

Рубрика: База знаний Опубликовано 22.12.2017 · Комментарии: Комментарии к записи Серология отключены · На чтение: 5 мин · Просмотры: — 8 552

Серология что это?

Серология (от лат. serum — «сыворотка», logos — «наука») представляет собой раздел иммунологии, который изучает специфику взаимодействия сывороточных антител с антигенами.

Основа диагностики — обнаружение специфических антител, которые образуются в качестве реакции на инфицирование организма определенным антигеном. В зависимости от того, какие антитела обнаружены в крови, делается вывод о характере инфекции, а количество этих антител говорит о степени активности инфекционного заболевания.

Материал, взятый на исследование в рамках серологического анализа крови, изучается на предмет наличия ВИЧ-инфекции, сифилиса и других опасных заболеваний — герпеса, кишечных инфекций, краснухи, токсоплазмоза, хламидиоза, кори, вирусных гепатитов, хламидиоза. Кроме того, это исследование позволяет утвердить группу крови, определить специфичность белков.

Итак, серологические исследования проводят:

  • если поставлен предварительный диагноз и теперь требуется его подтверждение. Исследование основывается на добавлении соответствующего антигена в сыворотку крови. Ответная реакция позволяет сделать вывод о налиии или отсутствии заболевания;
  • если диагноз поставить не удается. В рамках исследования в кровь добавляют антитела и определяют вид антигенов, что позволяет определить конкретное заболевание;
  • если необходимо подтвердить группу крови и резус-фактор.

Таким образом серологический анализ крови помогает поставить диагноз или назначить наиболее эффективное лечение — при минимальных временных и финансовых затратах.

К достоинствам серологических исследований можно отнести:

  • возможность выявления патологических микроорганизмов на ранних стадиях инфекции;
  • контроль развития заболевания и уровень эффективности проводимой терапии;
  • отсутствие необходимости специальной подготовки перед взятием биоматериала;
  • оперативность. Результат будет доступен через два-три часа, что в условиях стационарного лечения очень важно;
  • финансовую доступность реагента, что позволяет проводить пробы так часто, как это нужно;
  • отсутствие противопоказаний.

Как проводится серологическое исследование

Забор крови проводится из локтевой вены. Важный момент — кровь берется не шприцом, а самотеком — в вену вводится игла без шприца и собирается в пробирку до пяти мл крови. Проводится процедура с утра натощак.

В зависимости от реакций, которые лежат в основе исследования, выделяют несколько видов процедур:

  1. реакция нейтрализации. Основывается на свойстве антител иммунной сыворотки реагировать как нейтрализующее средство на микроорганизмы или токсины, предупреждая их негативное воздействие на организм;
  2. реакция агглютинации. Может быть прямой или непрямой. В первом случае речь идет об изучении сыворотки крови на предмет присутствия антител (осуществляется вброс убитых микробов в материал, и оценивается реакция — если есть осадок в виде хлопьев, реакция положительная), непрямая реакция основана на введении в материал эритроцитов с адсорбированными на них антигенами (фестончатый осадок говорит о положительной реакции);
  3. реакция преципитации. Раствор антигена наслаивается на иммунную сыворотку (выполняет роль жидкой среды). Используется растворимый антиген. Если комплекс антиген-антитело выпадает в осадок, реакция считается положительной;
  4. реакция с участием комплемента. Область применение — обнаружение инфекционных заболеваний. Активируется комплемент и исследуются реакции;
  5. реакция с мечеными антигенами и антителами. Основывается на том, что антигены тканей или микробы, обработанные особым образом, начинают излучать свет под воздействием УФ-лучей. Метод широко применяется не только при диагностике антигенов, но также для определения гормонов, ферментов, лекарственных средств.

К сдаче анализа необходимо подготовиться: за четыре дня пациент должен отказаться от приема сердечных препаратов, нужно также исключить алкоголь в любом его проявлении, острую и жирную еду, сладости, ограничить физические усилия, избегать стрессов.

Если не соблюдать эти правила, повышается риск ложноположительного результата. Перед назначением повторной сдачи анализов врач обязательно должен выяснить, что делал пациент за день до процедуры, и дать рекомендации по правильной подготовке к обследованию.

Серологический анализ: расшифровка

Серологическое исследование крови — анализ, который позволяет определить/подтвердить тип возбудителя инфекции, помогает специалисту поставить диагноз. Это незаменимая помощь, если врач не может подобрать лекарственную терапию, так как возбудители различных заболеваний отличаются разной чувствительностью к действию конкретных лекарств и антибиотиков.

После того, как процедура сбора материала закончена, лаборанты приступают к следующему этапу — расшифровывают показатели. Так, если в крови у пациента антитела не обнаружены, можно делать вывод, что в организме нет инфекций — результат анализа в таком случае положительный.

Но такое положение вещей, скорее, исключение из правил: если есть симптомы заболевания, серологические исследования выявляют и доказывают наличие серьезной патологии в организме.

Сначала в организме с помощью анализа находят возбудителей заболеваний, далее оценивают количество антител, на основании чего делают вывод о том, насколько серьезно развита инфекция.

Серологическое исследование на гепатит, ВИЧ, сифилис: особенности

Сифилис. При проведении анализа на сифилис специалисты ищут белки, отвечающие за поступление в человеческий организм возбудителя инфекции — речь идет о трепонеме бледной. В качестве биологического материала в этом случае выступает сыворотка крови.

Гепатиты. Вирусные гепатиты — серьезные инфекционные заболевания, опасность которых заключается в том, что они достаточно долгое время могут жить в организме, никак себя не проявляя. Выявить заболевание в ранней фазе, когда оно лучше поддается лечению, можно проведя анализ на маркеры — маркеры появляются в крови после перенесенного заболевания или введения вакцины.

Нужно понимать, что выявление возбудителя возможно только через 1,5-2 месяца после инфицирования. Если анализ сдает беременная женщина, возможен ложноположительный результат.

Рекомендуем к просмотру медицинский сайт https://tabletix.ru/. На сайте найдете полезную информацию, врачебные мнения.
Если вы наблюдаете один или несколько из симптомов, указанных ниже, стоит задуматься о сдаче серологического анализа:

  • рвота;
  • плохой аппетит или его отсутствие;
  • беспричинное бессилие организма, переутомление;
  • желтоватый цвет лица;
  • изменения цвета кала и мочи.

ВИЧ. Если анализ на ВИЧ показал положительный результат, это не говорит о том, что пациент инфицирован СПИДом. Если заражение произошло недавно (не более двух месяцев назад), наличие антител не позволяет определить факт развития заболевания. Назначается повторное исследование.

Серологический анализ крови — важнейший метод исследования, основное назначение которого заключается в оперативном выявлении вирусов, инфекций, микробов в организме.

Этот уникальный лабораторный «инструмент» позволяет определить любое заболевание, которое является следствием угнетения иммунитета, поэтому не ленитесь, а регулярно сдавайте анализ, чтобы иметь возможность вовремя выявить болезнь и быстро от нее избавиться.