ПЦР real time

Содержание

ПЦР в реальном времени

  • Амплификатор в режиме реального времени Agilent Stratagene MX3005P
  • Амплификатор в режиме реального времени Agilent Stratagene MX3000P
  • Амплификатор детектирующий в режиме реального времени ДТпрайм
  • Амплификатор для количественной ПЦР Agilent Aria MX
  • Амплификаторы в режиме реального времени Thermo QuantStudio
  • Лабораторное оборудование Stratagene для ПЦР
  • Приборы для ПЦР в реальном времени «АНК-32» и «АНК-М»
  • Система ПЦР в реальном времени Applied Biosystems 7500
  • Термоциклер для ПЦР в реальном времени PikoReal
  • Термоциклер для ПЦР в реальном времени TOptical
  • Экспресс-амплификатор в режиме реального времени АНК-4

В настоящее время в практическое здравоохранение внедряется новая технология ПЦР — ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ, Real-Time PCR). Ее принципиальной особенностью является мониторинг и количественный анализ накопления продуктов полимеразной цепной реакции, а также автоматическая регистрация и интерпретация полученных результатов. Этот метод не требует стадии электрофореза, что позволяет снизить требования, предъявляемые к ПЦР лаборатории. Благодаря экономии производственных площадей, уменьшению количества персонала и востребованности количественного определения ДНК/РНК этот метод в последние годы успешно применяется в крупнейших санитарно-эпидемических, диагностических и научно-исследовательских центрах развитых стран мира, замещая ПЦР в ее сегодняшнем («классическом») формате.

Существует два основных подхода к детекции результатов ПЦР в реальном времени: с помощью интеркалирующих красителей и на основе флуоресцентно-меченых олигонуклеотидных зондов.

Низкоспецифичная детекция результатов ПЦР-РВ с помощью интеркалирующих красителей

Детекция продуктов амплификации возможна за счет увеличения флуоресценции интеркалирующего красителя при образовании комплекса с двуцепочечной ДНК. Самый популярный краситель на сегодняшний день — SYBR Green I. Это чувствительный флуоресцентный индикатор двухцепочечной ДНК. Максимум флуоресценции в комплексе с ДНК составляет 521 нм, максимум возбуждения — 497 нм (второй максимум около 254 нм). Хорошо возбуждается стандартным 488-нм лазером. Квантовый выход флуоресценции — около 0.8 (что в 5 раз превышает квантовый выход комплекса этидий-ДНК).

Реже применяются красители EVA Green, LCGreen, Cyto9. Низкая специфичность детекции результатов ПЦР-РВ при использовании интеркалирующих красителей обусловлена тем, что флуореценция раствора вызывается накоплением любой двуцепочечной ДНК в реакционной смеси, в том числе и неспецифической! Следовательно, остается вероятность регистрации ложноположительного результата.

Как работает ПЦР в реальном времени c использованием специфичных зондов?

Более высокой специфичности детекции результатов ПЦР в режиме реального времени можно достигнуть за счет наличия в реакционной смеси дополнительного олигонуклеотида — гибридизационного зонда. Такой зонд «отжигается» (комплементарно соединяется с ДНК) на участке ампликона меджу прямым и обратным праймером. На разных концах зонда расположены флуорофор и тушитель флуоресценции этого красителя. Когда флуорофор и тушитель связаны с олигонуклеотидным зондом, наблюдается лишь незначительная флуоресцентная эмиссия. Во время процесса амплификации за счет 5`-экзонуклеазной активности Taq-полимеразы флуоресцентная метка переходит в раствор, освобождаясь от соседства с тушителем и генерирует флуоресцентный сигнал, усиливающийся в реальном времени пропорционально накоплению амплификата.

Таким образом, в случае если используемые праймеры «отожгутся» на неспецифических участках с образованием в ходе ПЦР-РВ «нецелевого» продукта, то его последовательность не будет иметь участок, комплементарный гибридизационному зонду и, соответственно, «нецелевые» ампликоны не будут регистрироваться как целевые. При этом для такого варианта ПЦР-РВ можно одновременно использовать несколько видов красителей и гасителей их флуоресценции (с неперекрывающими спектрами излучения). Это позволяет осуществлять мультиплексную ПЦР.

Оборудование и расходные материалы для ПЦР анализа в реальном времени


Амплификатор в режиме
реального времени Mx3005P

Амплификатор в режиме
реального времени Mx3000P

Амплификатор в режиме
реального времени TOptical

Термоциклер для ПЦР
в реальном времени PikoReal

Система ПЦР в реальном
времени Applied Biosystems 7500

Амплификатор в режиме
реального времени АНК-32-М
Экспресс-амплификатор
в режиме реального времени АНК-4
Реагенты для ПЦР Системы для выделения
и очистки нуклеиновых кислот
Лабораторный пластик и посуда Автоматические пипетки Центрифуги и вортексы
Амплификатор для ПЦР
в реальном времени
Smart Cycler II
ПЦР боксы для стерильных работ Термоблоки

Полимеразная цепная реакция в реальном времени (Real-Time PCR)

Екимов А.Н., Шипулин Г.А., Бочкарев Е.Г. Рюмин Д.В.

ЦНИИ Эпидемиологии РФ

Принципиальной особенностью полимеразной цепной реакции в реальном времени является возможность детекции накопления продуктов амплификации непосредственно во время проведения амплификации. Так как кинетика накопления ампликонов напрямую зависит от числа копий исследуемой матрицы, это позволяет проводить количественные измерения ДНК и РНК инфекционных агентов. Полученная информация может быть использована для проведения мониторинга эффективности проводимой терапии, оценки клинического прогноза. В отличие от других методов количественного определения ДНК матрицы в пробе, ПЦР в реальном времени не требует дополнительных манипуляций, связанных с раститровкой ДНК исследуемой пробы или полученных в ходе ПЦР ампликонов, которые усложняют постановку анализа и могут приводить к появлению ложноположительных результатов. Подобный подход позволяет отказаться от стадии электрофореза, что ведет к резкому уменьшению вероятности контаминации исследуемых проб продуктами амплификации, а также позволяет снизить требования, предъявляемые к ПЦР лаборатории.

Введение.

Широкое внедрение в область практического здравоохранения полимеразной цепной реакции (ПЦР) обусловлено простотой ее выполнения, низкой себестоимостью и надежностью. Вместе с тем, сегодня уже очевидно, что дальнейшее развитие ПЦР получит в области количественного определения нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) инфекционных агентов.

Количественное определение ДНК инфекционных агентов в ходе лечения позволяет получать информацию о правильности или безрезультатности проводимой терапии, помогает предсказывать периоды обострения заболевания и принимать адекватные меры для скорейшего излечения больного без нанесения ущерба для его здоровья, связанного с неэффективной терапией.

Существует большое количество способов получить данные о концентрации нуклеиновых кислот в пробе методом ПЦР, но все они требуют дополнительных трудоемких этапов работы, связанных с предварительной раститровкой выделенной из анализируемой пробы ДНК, или полученных в ходе ПЦР ампликонов, что приводит к увеличению времени, необходимого для постановки анализа и сложности интерпретации полученных результатов . Также, наличие дополнительных этапов работы увеличивает вероятность ошибки и получения недостоверного результата.

ПЦР в реальном времени.

На сегодня существует метод, лишенный вышеперечисленных недостатков — это метод ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR) . Сущность метода заключается в исследовании накопления продуктов амплификации с помощью специального прибора без последующего электрофореза. Так как кинетика накопления продуктов амплификации связана с исходным количеством матрицы, это дает возможность точно оценить её количество .

Отличительными чертами данного метода, в отличие от классической ПЦР, является возможность количественного определения ДНК/РНК инфекционных агентов в исследуемом материале, отсутствие стадии электрофореза, менее строгие требования к организации ПЦР-лаборатории и автоматическая регистрация и интерпретация полученных результатов.

Отсутствие стадии электрофореза позволяет минимизировать риск контаминации продуктами ПЦР и таким образом резко уменьшить число ложноположительных результатов. Поскольку регистрация результатов проводится непосредственно в процессе ПЦР, весь анализ можно проводить в одной-двух комнатах лаборатории и нет необходимости в отдельном помещении для детекции продуктов реакции.

Данная методика в течение последних пяти лет успешно применяется в крупнейших диагностических и научно-исследовательских центрах развитых стран мира и в ближайшее время станет так же широко распространена, как и ПЦР в ее сегодняшнем формате, благодаря экономии производственных площадей, уменьшению количества персонала и востребованности количественного определения ДНК/РНК.

Использование математических методов анализа позволяет проводить автоматическую интерпретацию полученных результатов и снимает проблему субъективной оценки электрофореграмм.

Материальная база.

Для постановки ПЦР в реальном времени необходим специальный амплификатор, отличительной особенностью которого является возможность возбуждать и детектировать флуоресценцию, отражающую накопление ампликонов, на каждом цикле амплификации.

Детекция продуктов амплификации.

Для выявления продуктов амплификации в режиме реального времени используют следующие наиболее распространенные подходы:

1. Выщепление 5′ концевой метки (TaqMan Assay).

Данная методика основана на использовании 5′-экзонуклеазной активности полимеразы. В реакционную смесь добавляют ДНК-зонды, в состав которых входит флуоресцентная метка в 5′-положении и гаситель флуоресценции в 3′-положении, а также фосфатная группа в 3′-положении. Эти зонды имеют места посадки внутри амплифицируемой области. Гаситель поглощает испускаемое флуоресцентной меткой излучение, а фосфатная группа в 3′-положении блокирует полимеразу.

В ходе ПЦР во время стадии отжига праймеров происходит присоединение ДНК-зонда к комплементарной цепи ДНК, причем чем больше продуктов амплификации образуется в ходе ПЦР, тем больше молекул зондов свяжется с соответствующими ампликонами. Во время стадии элонгации полимераза синтезирует комплементарную цепь ДНК и при достижении зонда начинает его расщеплять благодаря наличию 5′-экзонуклеазной активности. Таким образом происходит разъединение флуоресцентной метки и гасителя, что приводит к увеличению детектируемого свечения . Очевидно, что чем больше ампликонов было наработано в ходе ПЦР на данный момент времени, тем интенсивнее будет свечение.

2. Использование зондов с комплементарными концевыми последовательностями (molecular beacons).

Данная методика отличается от описанной выше тем, что концевые последовательности зонда представляют собой взаимно комплементарные области, поэтому при температуре отжига праймеров они схлопываются и образуют шпильки . Внутренняя область зондов содержит нуклеотидную последовательность, комплементарную амплифицируемой области. При отжиге праймеров зонды, не присоединившиеся к ДНК матрице, остаются в «схлопнутом» состоянии, так что происходит тушение флуоресценции.

Те же зонды, которые отжигаются на матрицу, разворачиваются, и флуоресцентная метка и гаситель расходятся в разные стороны. Таким образом, увеличивается интенсивность свечения.

3. Применение 2-х зондов с резонансным переносом энергии (LightCycler assay).

Данный способ детекции накопления продуктов амплификации отличается повышенной специфичностью, так как увеличение флуоресценции происходит при комплементарном связывании с ампликонами сразу 2-х ДНК зондов . Принцип метода заключается в переносе энергии от одного флуорофора, находящегося на 3` конце первого зонда, ко второму флуорофору, находящемуся на 5` конце второго зонда, причем расстояние между флуорофорами составляет 1-3 нуклеотида.

При одновременном связывании обоих зондов с ДНК матрицей испускаемое первым флуорофором излучение передается на второй флуорофор, а его излучение детектируется прибором. Таким образом, возрастает специфичность анализа.

4. Использование интеркалирующих агентов.

Этот способ детекции основан на том факте, что флуоресценция бромистого этидия и SYBR Green I значительно возрастает при их внедрении в двухцепочечные молекулы ДНК . Таким образом, можно наблюдать за накоплением продуктов амплификации.

Очень важно отметить то, что увеличение флуоресценции может быть связано как с накоплением специфического продукта, так и неспецифического (праймеры-димеры, шмер). Для получения корректных результатов необходимо дополнительное изучение полученных ампликонов с помощью построения так называемых «кривых плавления» (melting curves).

Кривые плавления

Для этого после окончания ПЦР реакционную смесь нагревают и непрерывно измеряют флуоресценцию. По достижении температуры плавления продукта амплификации флуоресценция резко снижается.

Каждое резкое уменьшение флуоресценции на графике соответствует числу полосок, получаемых на электрофорезе, то есть числу разных типов ампликонов. Для облегчения работы с полученной информацией проводят дифференциальный анализ кривой плавления. Такой способ визуализации полученных данных гораздо удобнее для понимания и анализа.

Применение кривых плавления не ограничивается только детекцией продуктов амплификации с помощью бромистого этидия и SYBR Green I. При использовании кривых плавления в системах с ДНК-зондами (Taq-man assay, beacons) возможно различать точечные мутации, расположенные внутри областей связывания ДНК-матрицы и зонда. Наличие таких мутаций способно привести к изменению температуры плавления зонда и к изменениям в графике кривой плавления . Использование кривых плавления не требует от оператора амплификатора никаких дополнительных манипуляций с пробирками, а интерпретация полученных данных автоматизирована и формализована.

Подводя итоги стоит отметить следующее: использование ДНК-зондов в том или ином варианте является наиболее предпочтительным в свете повышения специфичности анализа. Однако к недостаткам зондов относится высокая стоимость, что делает работу по подбору зондов, праймеров и условий амплификации дорогостоящей. Вместе с тем, использование интеркалирующих агентов является очень простым и дешевым. Отпадает необходимость подбора специальных праймеров, зондов, так как можно пользоваться уже используемыми праймерами, эффективность работы которых уже проверена. Эти обстоятельства делают применение интеркалирующих агентов весьма привлекательным.

Заключение

В настоящее время создана научная и материально-техническая база для широкого внедрения в клиническую лабораторную диагностику новой генодиагностической технологии — количественного определения ДНК/РНК инфекционных агентов — ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR). В ближайшие годы данная технология будет применяться в гепатологии (вирусные гепатиты В и С), в клинике ВИЧ и ВИЧ-ассоциированных инфекций (в первую очередь герпетическая и цитомегаловирусная инфекции), в дерматовенерологии, фтизиатрии, гастроэнтерологии, пульмонологии. С помощью ПЦР в реальном времени будет оцениваться эффективность проводимой терапии и клинический прогноз заболевания.

Список литературы

ПЦР для начинающих

Руководство по ПЦР в реальном времени для начинающих

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР – это настоящий краеугольный камень современной молекулярной биологии. В наше время все большее распространение получает ее «продвинутая» версия под названием полимеразная цепная реакция в реальном времени (Real-time PCR), благодаря которой стало возможным раскрыть максимальный потенциал данной методики.

Чтобы понять суть Real-time PCR, необходимо имеет представление о том, какие процессы проходят в пробирке во время «обычной» ПЦР.

ПЦР представляет собой реакцию амплификации молекул ДНК. Рассмотрим два случая, когда в исследовательской практике возникает необходимость амплифицировать (то есть увеличить во много раз) количество ДНК в образце. Например, для судмедэксперта важно размножить небольшое количество ДНК, которая была найдена на месте преступления. Либо исследователю нужно сравнить два образца и узнать, в каком из них больше ДНК. Для такого рода анализа необходимо, чтобы в образце было достаточно ДНК для ее детекции. Если ДНК слишком мало, в сравниваемых образцах проводят ПЦР при одних и тех же условиях, и по количеству амплифицированного продукта определяется, в каком из образцов было больше ДНК изначально.

Главным веществом, благодаря которому происходит ПЦР, является термостабильная ДНК-зависимая ДНК-полимераза. Этот фермент синтезирует цепочку ДНК из свободных нуклеотидов, содержащихся в реакционной смеси (dNTPs), по принципу комплементарности. Матрицами для создания новых цепочек являются исследуемые молекулы ДНК. Важный момент – ДНК-полимераза «работает» на одноцепочечной ДНК, при этом «точка старта» для нее может быть только на двухцепочечной ДНК.

Именно эта особенность данного фермента позволяет амплифицировать только те фрагменты ДНК, которые интересны исследователю, а не весь геном организма сразу. Для этого в реакционную смесь добавляют небольшие фрагменты ДНК (олигонуклеотиды), называемые праймерами (англ. primer, то есть «первичные»). Они присоединяются (отжигаются) на матричную молекулу ДНК вокруг исследуемого гена, запуская работу полимеразы в нужном направлении.

Контроль ПЦР обеспечивается благодаря смене температуры образцов – за счет этого обеспечивается регуляция активности фермента и присоединения праймеров.

Для того, чтобы начать реакцию, температуру повышают до 95°C. При такой температуре двухцепочечная ДНК денатурирует до одноцепочечной.

Потом температуру понижают до ~60°C. Это позволяет праймерам присоединиться вокруг исследуемого фрагмента.

Таким образом, у полимеразы появляется точка старта, от которой она может начинать синтез новой цепочки ДНК:

Оптимальная температура для работы ДНК-полимеразы составляет 72°C, поэтому на этом этапе цикла (он называется элонгацией) температура образца повышается до 72°C, для того, чтобы фермент работал с максимальной скоростью.

По окончанию цикла мы получаем в 2 раза больше ДНК, чем было в начале.

Такие температурные изменения повторяются по кругу в течение 40 «циклов». То есть, из одной копии ДНК получаются две, из двух – четыре, из четырех – восемь и так далее, пока их количество не будет исчисляться миллиардами.

После амплификации полученную ДНК можно разделить на агарозном геле и окрасить (визуализировать). Чем ярче будет полоса на геле, тем большее количество копий нужных нам генов получилось в результате реакции.

ПЦР в реальном времени (Real-time PCR)

Точно такие же принципы лежат в основе ПЦР в реальном времени. Но вместо того, чтобы оценивать продукты амплификации на геле после проведения реакции, за этим процессом можно наблюдать «онлайн». Обеспечивается это тем, что образец, помещенный в амплификатор, на протяжении всего процесса находится под наблюдением специальной камеры, которая называется детектором.

Существует множество технологий мониторинга процесса ампификации, но суть у них одна: при синтезе каждой новой копии ДНК возникает флуоресцентный сигнал, который улавливается детектором. Чем интенсивней флуоресценция, тем больше продуктов амплификации находится в образце.

ПЦР в реальном времени имеет множество преимуществ перед обычной ПЦР:

  • Во-первых, за реакцией возможно наблюдать с самого начала и сразу увидеть, в каких образцах реакция запустилась успешно, а в каких – нет.
  • Можно очень точно рассчитать эффективность реакции.
  • Нет необходимости проводить гель-электрофорез, так как все показатели реакции будут четко показаны на амплификационной кривой.
  • Самым большим преимуществом является возможность проводить полноценно количественную оценку экспрессии генов. Обычная ПЦР является, в лучшем случае, полуколичественным методом анализа.

Зонд или SYBR® Green. Выбор правильной системы визуализации для вашего эксперимента.

Приступая к планированию ПЦР-анализа, важно определить систему визуализации продуктов реакции. В общем случае, существуют две системы: интеркалирующие красители (напр. SYBR® Green) и растворы, основанные на линейно разрушаемых зондах (напр. TaqMan®). В основе обоих систем состоит принцип генерирования флуоресцентных сигналов при синтезе новых копий ДНК и детекции этих сигналов прибором в режиме реального времени.

SYBR® Green (или любой другой интеркалирующий краситель)

SYBR® Green является наиболее используемым интеркалирующим красителем в современной практике. Кроме него существует множество других красителей подобного класса, но наверняка вы слышали именно о SYBR® Green. Принцип действия у них один: сам краситель имеет собственный флуоресцентный фон, но связываясь с двухцепочечной ДНК, он встраивается между ее цепочками. Это приводит к изменению конфигурации молекулы красителя, заставляя ее флуоресцировать горазда сильнее. Все просто – чем больше ДНК образуется в процессе ПЦР, тем сильнее происходит флуоресценция в образце.

Линейно разрушаемые зонды (по типу TaqMan®)

ДНК-зонды представляют собой меченые флуоресцентными красителями олигонуклеотиды (короткие фрагменты ДНК). Их нуклеотидная последовательность такова, что они гибридизируются на матричной молекуле ДНК рядом с праймером и дают флуоресцентный сигнал. 5’-конец зонда мечен репортерным флуоресцентным красителем. Чаще всего используется зеленый краситель FAM, но также могут использоваться VIC, ROX, CY5 и другие, которые флуоресцируют на другой длине волны, благодаря чему возможно проводить одновременный анализ по разным каналам детектора. На 3’-конце зонда располагается молекула гасителя – она обеспечивает подавление флуоресценции метки. Таким образом, когда репортерный краситель и его гаситель находятся на физически близком расстоянии друг от друга, общий уровень флуоресценции низкий.

В процессе ПЦР зонд прикрепляется к матричной молекуле ДНК сразу после праймера. Далее, зонд расщепляется полимеразой во время реакции. За счет этого молекула гасителя оказывается далеко от репортера, его флуоресценция возрастает, и так происходит на каждом цикле ПЦР.

Что нужно учитывать: стоимость

Оценка стоимости является неотъемлемой частью планирования исследований. Использование линейно разрушаемых зондов обходится дороже, чем интеркалирующих красителей. То есть, если вас интересует большое количество генов, интеркалирующий краситель будет наилучшим выбором. Если же у вас есть небольшой набор генов и вам надо сосредоточится исключительно на них, следует использовать зонды.

Что нужно учитывать: специфичность

Зонды: В общем случае, линейно разрушаемые зонды дают более точные результаты. Объясняется это их высокой специфичностью. Если вы получаете флуоресцентный сигнал от зонда, то можно быть уверенным, что он гибридизировался именно с целевым участком генома – гибридизация происходит исключительно в ограниченом праймерами пространстве. Благодаря этому нет необходимости проводить постамплификационных анализов для того, чтобы убедиться, что все прошло правильно.

Интеркалирующие красители: Слабым местом интеркалирующих красителей является то, что они неспецифичны. Если во время ПЦР поисходит амплификация не того участка ДНК, либо вовсе нескольких разных участков, вы все равно получаете кривую амплификации, которая идентична кривой при амплификации целевых генов. Интеркалирующие красители генерируют флуоресцентный сигнал при связывании с любой двухцепочечной ДНК, независимо от ее нуклеотидной последовательности. То есть, необходимо проводить дополнительные анализы, которые подтверждают наличие специфичных продуктов амплификации, например, оценку графика температуры плавления ампликонов. Подобные виды анализов требуют высокого уровня квалификации оператора, но только благодаря им можно рассчитывать на достоверность полученных данных.

Что нужно учитывать: количество ДНК-матрицы

Так как интеркалирующие красители обладают малой специфичностью, их эффективность при низкой концентрации ДНК в образце крайне мала. При таких условиях праймеры часто образуют между собой димеры или отжигаются на нецелевых участках ДНК. При этом образуется двухцепочечная ДНК и интрекалирующие красители все равно будут давать сигнал.

Можно взять за правило: если количество ДНК в ваших образцах малое (значение Cq>30), то использование интеркалирующих красителей будет сопряжено с трудностями и рекомендуется применять линейно разрушаемые зонды. Если ДНК много (значение Cq<30), то интрекалирующие красители являются отличным выбором.

Реактивы и наборы реактивов

Все, что вам необходимо для проведения качественого Real-time PCR.

ПЦР в реальном времени является очень информативным и многофункциональным инструментом для молекулярной биологии. При правильном подборе методик, реактивов и оборудования возможно проводить исследования любого уровня сложности в кратчайшие сроки. Как и для опытных исследователей, так и для делающих первые шаги в науке, компания “ВМТ” окажет вам всестороннюю поддержку – мы являемся профессионалами своего дела и обеспечим максимально качественный результат ваших исследований.

ВМТ® Наборы для выделения ДНК/РНК

Наши наборы для выделения позволяют выделить ДНК и РНК практически из любого образца благодаря технологии сорбента на магнитных шариках – выделение происходит быстро, качественно и легко.

Наборы референтных генов

Для того, чтобы вы имели возможность проводить положительный контроль, ВМТ предоставляет широкий ассортимент референтых генов.

  • Главная
  • Программы и скидки
    • Месяц скидок на анализы и стоматологию к открытию центра у Московских ворот
    • Лабораторная диагностика заболеваний печени — 3500 ₽ вместо 4050 ₽
    • Диагностика пищевых причин метеоризма — 3300 ₽ вместо 3750 ₽
    • Диагностика гастрита и язвенной болезни
    • Онкологическая настороженность у женщин
    • Онкологическая настороженность у мужчин
    • ВНИМАНИЕ! Расширенный прием врачами-специалиcтами в трёх центрах Лабтест
    • Диагностика сахарного диабета
    • Полный гормональный спектр для щитовидной железы
    • Клинико-лабораторная диагностика остеопороза
    • Комплексная диагностика анемий
    • Программа обследования для госпитализации
    • Лабораторная диагностика целиакии
    • Лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний
    • Акция! ФИТНЕС — контроль здоровья спортсменов — 3 000 ₽ вместо 6 400 ₽
    • Акция! Общая биохимия — 3 300 ₽ вместо 4 200 ₽
    • Акция! Квантифероновый тест — 4 500 ₽ вместо 6 000 ₽
    • Выявление половых инфекций и выраженость бактериального вагиноза методом ПЦР — для женщин 2 600 ₽ вместо 3 200 ₽
    • Выявление половых инфекций методом ПЦР — для мужчин 2 200 ₽ вместо 2 800 ₽
    • Скрининг — 4 обязательных анализа: гепатит В, С, ВИЧ, сифилис RPR за 900 ₽
  • О компании
    • Лицензия
    • НАШЕ ОБОРУДОВАНИЕ
    • Наш персонал
    • Список страховых компаний
    • Анализы медицинские
    • Как подготовиться к сдаче анализа
    • Расшифровка анализа крови таблица
    • Результаты оценки условий труда
    • Вакансии
    • Форма отзыва
  • Адреса клиник
    • Медицинский центр у Московских ворот
    • Медицинский центр на Кондратьевском
    • Медицинский центр на Байконурской
    • Медицинский центр на Дмитровском
    • Медицинский центр на Будапештской
    • Медицинский центр на Косыгина
    • Медицинский центр на Михайлова
    • Медицинский центр Новые Колтуши
  • Клиентам
    • Запрос справки для налоговой
    • Нарушения иммунной системы
    • Дисконтная карта ЛабТест
    • График работы в праздники
  • Врачи-специалисты
    • Любимова Альфия Баграмовна — терапевт, гастроэнтеролог, врач УЗИ
    • Любимова Альфия Баграмовна — терапевт, гастроэнтеролог, врач УЗИ
    • Селиверстова Надежда Николаевна
    • Егормин Пётр Андреевич
    • Сафонова Нина Лаврентьевна
    • Борухович Максим Дмитриевич уролог
    • Малыгина терапевт
    • Морозова Людмила Викторовна гинеколог
    • Лукьянова Раиса Ивановна гинеколог
    • Тукало Марина Александровна гинеколог
    • Эрматова Аделя гинеколог и врач УЗД
    • Фесенко Татьяна Викторовна гинеколог
    • Деревяго Лариса Николаевна невролог
    • Лезникова Ольга Анатольевна гинеколог
    • Николин Константин Михайлович — кардиомониторинг
    • Ващенко Вероника Дмитриевна врач УЗИ
    • Ноомзоо Алис ЛОР
    • Техова Виктория Иналовна
    • Шулбаева Евгения Валерьевна дерматовенеролог
    • Эгбэ Акборнку ЛОР
    • Голина Ирина Викторовна дерматовенеролог
    • Мизанов Анатолий Абдумислимович профпатолог
  • Цены на анализы
    • Основные виды анализов
    • Аллергия и иммунология
    • Бактериология и ПЦР
  • Цены на услуги врачей
    • Стоматология
    • Водительские и оружейные комиссии
    • Гинеколог
      • Долгосрочный контрацептив для забывчивых – ИМПЛАНОН
      • Медикаментозный аборт
    • Уролог
      • ЛОД-терапия
    • УЗИ
    • Дерматовенеролог
      • Диагностика и удаление новообразований кожи
    • Эндокринолог
    • Кардиолог
      • Суточный мониторинг ЭКГ
    • Невролог
    • Гастроэнтеролог
    • Терапевт
    • Аллерголог — иммунолог
    • Хирург
      • Радиоволновая хирургия
    • Психиатр
    • Анализ клеща
    • Забор крови на дому
    • Услуга ЭКГ на дому
    • Справки в бассейн
  • Профосмотры и санкнижки
  • Водительские и оружейные комиссии
  • Статьи об исследованиях
    • Правила взятия материала для исследований
    • Квантифероновый тест на туберкулез
    • T СПОТ тб — диагностика туберкулеза методом t-spot.tb в СПб
    • Широкий спектр исследований для гастроэнтерологов
    • Технология ПЦР
    • Онкомаркеры
    • Клиническое значение изменений ГГТ
    • Клиническое значение ВПЧ
    • Цистатин С — ранний маркер снижения функции почек
    • Хромогранин А – скрининговый маркер в диагностике пептидообразующих нейроэндокринных опухолей
    • Лабораторная диагностика аллергии
    • Определение антител к вирусу кори
    • Про-гастрин-секретирующий белок (ProGRP) — биомаркер мелкоклеточного рака легких
    • Глистные инвазии, диагностика и лечение
    • Иммуннологическая диагностика Цистицеркозов
    • Диагностика АНИЗАКИДОЗА
    • Диагностика аутоиммунного гепатита
    • Фибротесты
    • Иммуноглобулин G4
    • Определение уровня аммиака крови
    • Пищевые аллергия и непереносимость
    • Флороценоз
    • Кальпротектин и другие анализы при заболеваниях кишечника
    • ИММУНОБЛОТ миозит-специфических антител
    • Волчаночный антикоагулянт
    • Гемоглобина и гемоглобин/гаптоглобиновый комплекс в кале
  • Записаться на прием
  • Результат анализа по E-mail
  • СПРАВКА ДЛЯ НАЛОГОВОЙ КОМПЕНСАЦИИ
  • Вопрос-Ответ
    • Вопросы по анализам
    • Вопросы врачам
    • Вопросы по медкомиссиям
  • Контакты
  • Новости для врачей
    • Вышла серия видеороликов о Лабтест
    • Мы обновили сайт LabTest-SPb.ru
    • О ВВЕДЕНИИ ТЕСТОВ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ IGM И IGG АНТИТЕЛ К MYCOPLASMA PNEUMONIAE
    • Набираем врачей-специалистов в новый медцентр сети Лабтест СПб